Uns quans conceptes d'Enginyeria Genètica

Reacció en cadena de la polimerasa

La PCR és una eina molt important en la tecnologia de l'ADN, ja que permet obtenir moltes còpies d'un ADN patró en poc temps i a partir de quantitats inicials molt petites..

Es basa en la utilització d'una ADN polimerasa que no es desnaturalitza a elevades temperatures obtinguda de l'especie bacteriana termòfila Thermus aquaticus. Aquest enzim s'anomena Taq-polimerasa.

Aixó permet separar les cadenes complementaries de l'ADN, elevant la temperatura. Una vegada separades, es deixa refredar el medi, s'afageixen "primer" específics i es deixa actual la Taq-pol, que genera una sequència complementària a cada un dels brins previament separats.

Enzims de restricció

Són unes endonucleases que hidrolitzen l'enllaç fosfodiéster en una posició específica d'una seqüència palindròmica (es a dir, les dues cadenes de l'ADN tenen la mateixa seqüència de nucleòtids, però de forma oposada).

L'enzim de restricció hidrolitza l'enllaç fosfosiéster de les dues cadenes entre els mateixos nucleòtids. Aixó fa que, en els extrems de cada bri quedin uns quans nucleòtids sense complementari (cadena simple), el que fa que tinguin tendència a aparellar-se amb seqüències complementaries. Aquests extrems s'anomenen "extrems enganxosos o cohesius" (sticky ends)

Açò permet que fragments d'origen divers, però generats amb el mateix enzim de restricció, es puguin unir fàcilment, creant molècules d'ADN a partir de segments que tenen diferent origen (espècies diferents per exemple).

Trascriptasa inversa

Aviat es comentarà

Electroforesi en gel. Southern-blot

Aviat es comentarà.

Utilització de plàsmids.

Clonació del gen

Aquest métode permet introcuir un gen en el plasmid bacterià. Després es pot cultivar aquest bacteri per que produeixi una determinada substància, per exemple. Fixeu-vos que aquests plàsmids contenen un o dos gens que confereixen resistència a antibiòtics.

Un experiment senzill que combina varies eines.

Aviat es comentarà